Noch fehlen oft Standardmethoden, um den Wirkstoffgehalt verfügbarer Allergieprodukte vergleichen zu können. In einem internationalen Ringversuch wurde nun ein Test für das Allergen Phl p 5 geprüft, gegen das ein Viertel der Europäischen Bevölkerung sensibilisiert ist.
Bei der durch Gräserpollen bedingten Allergie sind 60 bis 80 Prozent der Sensibilisierungen auf das Allergen Phl 5 des Lieschgraspollens (Phleum pratense) zurückzuführen. Eine inzwischen etablierte Methode, Heuschnupfen oder auch Insektenallergien zu behandeln, ist die De- bzw. Hyposensibilisierung, bei der die Betroffenen durch regelmäßige Gabe – in zunächst steigender Dosierung – des Antigens oral, sublingual (unter die Zunge) oder subkutan (unter die Haut) an das Allergen gewöhnt werden. Wichtig für eine erfolgreiche Behandlung ist es, die Qualität der Allergenprodukte sicherzustellen.
Die Eckpfeiler der Qualitätsanforderungen für Allergenprodukte sind in der allgemeinen Monographie Allergenzubereitungen des Europäischen Arzneibuchs (Europäische Pharmakopöe) festgelegt. Die Europäische Arzneimittelagentur (EMA) hat zudem Richtlinien zur Qualität und klinischen Entwicklung von Allergen-Immuntherapie(AIT)-Produkten festgelegt, um die Qualität von Produkten zur AIT weiter zu verbessern und zu harmonisieren. Als Ergebnis dieses regulatorischen Rahmens hat sich die Qualität von AIT-Produkten in den letzten Jahren zwar kontinuierlich verbessert. Dennoch ist es nach wie vor nicht möglich, verschiedene Produkte hinsichtlich ihrer Wirkstoffe zu vergleichen, da immer noch herstellerspezifische Analysemethoden für den Allergengehalt üblich sind.
Für eine produktübergreifende Vergleichbarkeit müssen daher Standardmethoden und entsprechende Allergenstandards etabliert werden. Das Biological Standardisation Programme (BSP) Projekt BSP090 des Europäischen Direktorats für die Qualität von Arzneimitteln (European Directorate for the Quality of Medicines & HealthCare, EDQM) hat sich die Etablierung von Referenzstandards und ELISAs- zur Quantifizierung von Bet v 1, dem Hauptallergen von Birkenpollen, Betula verrucosa und auch Phl p 5, einem Hauptallergen aus Wiesen-Lieschgraspollen, Phleum pratense, zum Ziel gesetzt. Die beiden rekombinanten Referenzstandards waren bereits 2012 etabliert und der Monographie Allergenzubereitungen hinzugefügt worden. Auch die Aufnahme des Bet v 1 ELISAs in die Europäische Pharmakopöe steht kurz bevor.
In dem internationalen Ringversuch unter Federführung von Prof. Stefan Vieths, Vizepräsident des Paul-Ehrlich-Instituts und Wissenschaftler:innen der Abteilung Allergologie wurde ein Phl p 5-spezifischer ELISA untersucht. ELISA steht für "Enzyme-linked Immunosorbent Assay". Dabei handelt es sich um ein Antikörper-basiertes Nachweisverfahren, das gezielt das Antigen Phl p 5 in Proben nachweist und quantifiziert. Bei dem hier verwendeten "Sandwich-ELISA" werden gleich zwei Antikörper verwendet, die spezifisch an das nachzuweisende Antigen binden.
An dem aufwendigen Ringversuch nahmen 14 Labore in Europa und den USA teil. Dabei wurde geprüft, ob der Test in den verschiedenen Laboren funktioniert und die Ergebnisse innerhalb eines Labors, aber auch zwischen den verschiedenen Laboren vergleichbar sind. Nur wenn Testsysteme einen solchen Ringversuch erfolgreich durchlaufen, sind sie geeignet, ins Europäische Arzneibuch als Standardmethode aufgenommen zu werden. Der hier validierte ELISA erwies sich als geeignet, rekombinantes und natürliches (natives) Phl p 5 mit der erforderlichen Genauigkeit zu quantifizieren. Aufgrund der Ergebnisse dieser Kooperationsstudie wird der spezifische Immuntest als verpflichtende Standardmethode für das Europäische Arzneibuch vorgeschlagen werden.
Quelle:
Zimmer J. et al: Standardisation of allergen products: 4. Validation of a Candidate European Pharmacopoeia Standard Method for Quantification of Major Grass Pollen Allergen Phl p 5. Allergy. 2021 Jul 9.